Музыкального воспитания детей 6 страница

Исследование влияния TGF-b на макрофаги интересно прежде всего тем, что с начала 90-х годов прошлого века существовало мнение, что макрофаги неспособны отвечать на TGF-b. Было известно, что моноциты несут на своей поверхности до 400 активных рецепторов к TGF-b и способны ответить на стимуляцию снижением своего воспалительного потенциала, однако зрелые макрофаги теряют способность реагировать на TGF-b по причине потери экспрессии рецептора (Ashcroft, 1999; Brandes et al, 1991; McCartney-Francis and Wahl, 1994; Wong et al, 1991). Действительно, эксперименты, проводимые с нестимулированными макрофагами, и макрофагами, дифференцированными в присутствии IL-4, подтвердили ранее опубликованные данные. Однако, физиологические условия, в которых происходит дифференцировка макрофагов, не ограничиваются отдельными цитокинами (в данном случае IL-4). В циркуляции млекопитающих присутствует натуральный ГК – кортизол. Синтетический аналог кортизола – дексаметазон, использованный в представленных в данной работе экспериментах в концентрациях, соответствующих физиологическим, эффективно поддерживал поверхностную экспрессию рецептора к TGF-b в первичных человеческих макрофагах. Более того, повышение концентрации дексаметазона до фармакологических приводило к существенному повышению поверхностной экспрессии рецептора. Особенно стоит отметить, что дексаметазон повышал поверхностную экспрессию TGFbRII на уровне регуляции его клеточной локализации, так как общее количество белка TGFbRII в клетках было постоянным независимо от наличия глюкокортикоидов в среде. Подобный эффект глюкокортикоидов, то есть регуляция клеточной локализации белков без изменения уровня их экспрессии, наблюдался ранее в случае вирусных гликопротеинов (John et al, 1988), бета-катенина (Guan et al, 2004) и компонента плотного контакта ZO-1 (Buse et al, 1995). Несмотря на то, что данный феномен известен уже почти 20 лет, механизм этого явления остается неизученным.

Обнаружение условий необходимых для сохранения способности макрофагов отвечать на TGF-b, позволило исследовать эффект этого фактора роста на экспрессию генов в макрофагах. Было обнаружено повышение экспрессии целого ряда факторов, регулирующих транскрипцию, участвующих в регуляции иммунного ответа и клеточной адгезии. Кроме того, в отдельную группу могут быть выделены гены, отвечающие за метаболизм липидов. Обнаруженные гены характерны для макрофагов, участвующих в хронических воспалительных процессах, таких как, например, атеросклероз. Соответствие полученного макрофагального фенотипа макрофагам, обнаруживаемым в атеросклеротической бляшке, прослеживается, прежде всего, по экспрессии генов, участвующих в метаболизме липопротеидов. Так было показано, что макрофаги атеросклеротической бляшки экспрессируют apolipoprotein E (APOE)(Ramji et al, 2006), лектин-подобный рецептор для oxLDL-1 (LOX или OLR1)(Draude and Lorenz, 2000), аполипопротеин C-II (APOC2)(Kawano et al, 2002), сортилин-подобный рецептор L (SORL1 или LR11), LRPAP1 и ABC транспортер ABCG1. Все эти гены участвуют в регуляции содержания холестерина в крови и так или иначе связаны с патогенезом атеросклероза (Carter, 2007; Ramji et al, 2006).

Однако, макрофаги атеросклеротической бляшки, имеющие фенотип характерный для хронического воспалительного процесса, по многим параметрам схожи с опухоль ассоциированными макрофагами. Наиболее ярким примером этого соответствия является повышенная экспрессия ферментов, участвующих в синтезе лейкотриена В4. Так в образцах опухолей пищевода обнаруживалась повышенная экспрессия ALOX5AP и LTA4 гидролазы – ферментов, необходимых для синтеза лейкотриена В4, роль которого в прогрессии и метастазировании опухолей была показана, например, для почечно-клеточной карциномы (Matsuyama et al, 2005).

Несмотря на то, что фенотип макрофагов, полученных в культуре при стимуляции IL-4, дексаметазоном и TGF-b отражает лишь некоторые свойства опухоль ассоциированных макрофагов, можно утверждать, что полученная модель отражает часть свойств необходимых этим клеткам для участия в патогенезе опухолей. Для приближения к физиологической ситуации необходимо включить в модель другие цитокины, производимые опухолью, сигналы, получаемые макрофагами в результате межклеточных контактов, а так же такие физические факторы, как гипоксия.

Выводы

Клонирование и функциональный анализ маркера макрофагов второго типа активации стабилина-1 позволяет утверждать, что данный белок представляет собой многофункциональный скавенджер рецептор, участвующий в эндоцитозе различных продуктов распада. Повышенная экспрессия стабилин-1 при стимуляции макрофагов дексаметазоном полностью согласуется с повышенным эндоцитозным потенциалом этого типа клеток.

На примере IL-4 и дексаметазона исследована гетерогенность популяции макрофагов второго типа активации. Показано, что для макрофагов, стимулированных IL-4 характерна продукция компонентов внеклеточного матрикса и ферментов для его перестройки, в то время как дексаметазон приводит к развитию макрофагов с высоким эндоцитозным и фагоцитозным потенциалом.

Исследование способности макрофагов первого и второго типов активации реагировать на различные экзо- и эндогенные стимулы позволило подтвердить гипотезу о пластичности макрофагального фенотипа.

Исследование макрофагов второго типа, стимулированных трансформирующим фактором роста бета, позволило выявить IL17RB как маркер этого типа макрофагов, что еще раз подтвердило концепцию гетерогенности макрофагальной популяции.

Дата добавления: 2017-02-01; Просмотров: 42; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!