Музыкального воспитания детей 1 страница

TGFbRII

TGFbRII

TGF-b

TGFbRII

Affymetrix.

TGF -b1

IL-17BR

Анализ базы данных EST выявил наличие нескольких возможных сплайс вариантов мРНК IL-17BR (Moseley et al, 2003) соответствующих мембран-связанной и растворимой формам рецептора. Экспрессию растворимой формы IL-17BR - sIL-17BR исследовали при помощи ПЦР, с праймерами расположенными внутри 8-го интрона. Эксперимент показал, что sIL-17BR экспрессируется в макрофагах, стимулированных IL-4 и IL-4 в комбинации с TGFb (Рис. 18A). С помощью количественной ПЦР было измерено общее количество транскриптов IL-17BR и отдельно количество транскриптов IL-17BR кодирующих мембрансвязанную форму рецептора. Оказалось, что мемрбансвязанные транскрипты IL-17BR составляют примерно 70% от общего количества транскриптов, и это соотношение не зависит от стимуляции макрофагов (Рис. 18B).

Рисунок 18. Анализ сплайс-вариантов мРНК и экспрессии белка IL-17BR в макрофагах. A. Анализ экспрессии мРНК, кодирующей растворимую форму IL-17BR, при помощи ПЦР. B. Анализ экспрессии тотальной мРНК IL-17BR (закрашенные столбики) и мРНК, кодирующей мембранную форму IL-17BR (незакрашенные столбики). C, D. Анализ экспрессии белка IL-17BR в различных макрофагах. Дорожка 1: клетки CHO-K1 трансфецированные плазмидой экспрессирующей hIL-17BR; дорожка 2: M1_IFNg; дорожка 3: M2_IL-4; дорожка 4: M2_IL-4/TGFb; дорожка 5: клетки CHO-K1, трансфецированные вектором.

Таким образом, подводя итоги этой части работы можно утверждать, что предложенная ранее система дихотомии макрофагальных фенотипов не отражает реальной ситуации. А именно, стимуляция макрофагов IL-4 приводит к повышению их способности перестраивать внеклеточный матрикс и производить цитокины, которые влияют на инфильтрацию клеток иммунной системы. При этом глюкокортикоиды в терапевтических концентрациях приводят к подавлению способности макрофагов перестраивать внеклеточный матрикс, но стимулируют их способность фагоцитировать как опсонизированный, так и неопсонизированный материал. Это свойство макрофагов объясняется повышением экспрессии скавенджер-рецепторов. Анализ эффектов других иммуносупрессорных факторов показал, что каждый из них способен вызывать строго индивидуальный спектр реакций макрофагов. Так маркером стимуляции макрофагов трансформирующим фактором роста бета (TGFb) является повышенная экспрессия IL-17BR. На основании этих данных можно утверждать, что популяция макрофагов в человеческом организме высоко гетерогенна и определяется цитокинами, ростовыми факторами и гормонами, характерными для той или иной ткани или органа.

Высокая гетерогенность макрофагов ставит вопрос о биологической целесообразности существования подобной популяции клеток и о способности этих клеток менять свои свойства в зависимости от изменения внешних условий. Кроме того, вопрос о пластичности макрофагального фенотипа неотделим от разработки терапевтических подходов. Во-первых, его нужно учитывать при разработке цитокиновых и гормональных терапий, так как при подобной терапии тканевые макрофаги могут приобрести нежелательные свойства, а во-вторых, при разработке терапий направленных непосредственно на изменение фенотипа макрофагов при таких заболеваниях, как опухоли или хронические воспаления.

В организме макрофаги сталкиваются с непрерывно изменяющимся набором сигналов, включающем многочисленные факторы, такие как цитокины, гормоны, сигналы от клеток ткани и патогены. Однако большинство экспериментальных систем используют всего лишь один стимул или простую статичную комбинацию стимулов. В последние годы все чаще стали появляться работы, указывающие на необходимость исследования последовательной стимуляции макрофагов, так как она необходима для формирования адекватной реакции. Данные работы обсуждаются в обзоре Стаута и Саттелс (Stout and Suttles, 2004). Так, было показано, что предварительная обработка макрофагов IFNg необходима для эффективной продукции TNF в ответ на стимуляцию липополисахаридом (Hayes et al, 1995b), та же обработка позволяет изменить ответ макрофагов на стимуляцию IL-10 (Herrero et al, 2003; Hu et al, 2002). Обработка макрофагов IL-4 перед стимуляцией липополисахаридом избирательно влияет на эффективность продукции TNF и IL-1a (D'Andrea et al, 1995; Major et al, 2002). Однако наиболее яркая зависимость от последовательности стимулов это полное инвертирование провоспалительного иммунного ответа в ответ на липополисахарид при предварительной обработке макрофагов иммунными комплексами (Anderson and Mosser, 2002; Gerber and Mosser, 2001; Grazia et al, 2001). Эти данные хорошо согласуются с результатами, описанными в представленной работе.

Активация макрофагов трансформирующим фактором роста бета

В то время, как эффекты различных противовоспалительных цитокинов на макрофаги подвергаются изучению в различных лабораториях, эффект трансформирующего фактора роста бета (TGF -b) на зрелые макрофаги практически не изучен. TGF-b это многофункциональный фактор роста, обладающий противовоспалительным эффектом. TGF-b действует на клетку через рецепторный комплекс, состоящий из 2 димеров, включающих рецепторы I и II типов, представляющие собой серинтреониновые протеинкиназы. Связывание TGF-b с рецептором приводит к активации TGFbRII, который фосфорилирует и активирует TGFbRI (De Caestecker, 2004). Активированный TGFbRI передает сигнал внутрь клетки за счет фосфорилирования рецептор-регулируемых (R-Smad) Smad2 и Smad3. Активированные R-Smad образуют гетеротример со Smad4 и транслоцируются в ядро. В ядре комплекс Smad связывается со Smad-связывающимся элементом в промоторах генов, что приводит к активации транскрипции. Способность клетки отвечать на белки из семейства трансформирующего фактора роста бета определяется спектром и количеством соответствующих рецепторов, экспрессирующихся на ее поверхности.

Дата добавления: 2017-02-01; Просмотров: 53; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!