Исследуемый материал и реактивы

V Ксантопротеиновая реакция.

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

1. Раствор яичного белка (1%). 2. Раствор нингидрина (0,5%).

В пробирку наливают 0,5 мл раствора яичного белка и прибавляют 5 капель 0,5% водного раствора нингидрина и нагревают на водяной бане до кипения. Появляется розово-фиолетовое или сине-фиолетовое окрашивание. С течением времени раствор синеет.

Данная реакция не является специфичной, поскольку её дают некоторые амины и амиды кислот.

Ксантопротеиновая реакция открывает наличие в белках циклических аминокислот – фенилаланина (Phe), тирозина (Tyr), триптофана (Trp), а также свободные перечисленные кислоты. Белки, в которых циклические аминокислоты отсутствуют, не дают ксантопротенновой реакции.

Принцип метода. Реакция обусловлена нитрованием бензольного кольца циклических аминокислот с образованием нитросоединений желтого цвета. При взаимодействии азотной кислоты с тирозином реакция нитрования протекает по следующему уравнению:

1.

тирозин (Tyr) динитротирозин

при подщелачивании возникает хиноидная структура, окрашенная в оранжевый цвет:

2.

динитротирозин натриевая соль динитротирозина

хиноидная форма хиноидной структуры

(насыщенный желтый) (оранжевый)

1. Раствор яичного белка (1%). 2. Азотная кислотаконцентрированная. 3. Гидроскид натрия(10%).

Дата добавления: 2017-02-01; Просмотров: 94; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!